法医学病理检材的提取、固定、取材及保存规范GA/T 148-2019(20191201)
本规范由中华人民共和国公安部于2019年10月14日发布,自2019年12月1日起实施。代替已废止的GA/T 148-1996。
目 次
1 范 围
2 规范性引用文件
3 总 则
4 法医病理学检材的提取步骤和方法
5 法医病理学检材的固定液选择及配制方法
6 法医病理检材的固定方法和要求
7 法医病理检材的包装、送检方法及要求
8 法医病理实验室检验及主要器官的切取方法
9 法医病理检材的保存与处理
1范 围
本标准规定了法医学中病理检材的提取、固定 、包装、送检,取材及保存的原则 、内容和方法。
标准适用于各级公安、检察机关 、医学院校及面向社公服务的鉴定机构所进行的法医病理学检验。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的,凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
3总 则
3.1 法医病理检材提取前应了解有关信息,死者的姓名、性别、年龄、民族、住址、职业、生前健康状况等。
3.2 为了保证法医组织病理学检验鉴定结论的准确性,病理检材的提取应尽早进行。
3.3 尸检中提取病理检材时应详细检验、记录、拍照尸表及剖验组织器官的表面、切面等损伤和病变,病变及损伤的大小以长 ×宽×深或厚(cm)表示,测量器官的大小以长×宽×厚(cm)表示,重量以g表示,皮质厚度以cm表示,体液含量以mL表示。
3.4 颅腔、胸腔、腹腔及盆腔内的器官,无论是否有明显病变和(或)提伤,常规应完整提取脑、心、双肺:对肝、脾、双肾、胰腺、胃、肠、扁桃体、甲状腺和肾上腺等主要器官,应尽量多提取检材,必要时可提取其他部位的组织,脏器组织的提取、检验,
按照 GA/T 147,GA/T 151及GA/T 170 执行。
3.5 从大体标本切取检材时,可根据检验需要选择取材方向,常规于标本断面平行取材:组织块应在充分包括肉眼病变的前提下,保留部分正常组织,形状尽量规则(比如正方形、长方形),包埋面应平整:组织块大小(面积一般在1cm~1.5cm×lcm~1.5cm以内)以不超过常规包埋盒面积为宜,厚度常为0.2cm~0.3cm(不应大于0.5cm): 若有自动包理、打码设备,应在蜡块外包装上打印唯一性编号并作好记录:若无上述条件,则对一个标本取多个组织块或对左右对称器官取材时,组织块形状应有所不同,并编号标注,便于蜡块与原始取材部位对应。
3.6 本标准给出的组织块取材数量均按常规取材给出,根据检验需要,可删增取材数量,必要时补充取下。
4法医病理学检材的提取步骤和方法
4.1 尸表检验检材的提取方法和要求
4.1.1 颈部损伤检材的提取方法和要求:分层解剖颈部皮肤及皮下组织,提取损伤处组织,组织块应带部分正常组织;提取颈部索沟处皮肤时,取材应沿与索沟走行相垂直做纵向切取,组织块应带有部分正常皮肤,必要时,应对颈部可疑出血处软组织及颈浅、深淋巴结取材、备检。
4.1.2 电流斑的提取方法和要求:对直径小于3cm~ 4cm的损伤,应完整切取,并在损伤边缘保留部分正常组织,如见多处相同损伤应提取2处以上,直径大于4cm的损伤,宜完整提取,如不能,可跨损伤的最大直径切取约1cm宽的条状组织两块,两端均应带部分正常组织。提取组织时,应避免挤压和金属类工具接触损伤部位,以免局部组织受压变形和影响金属元素理化检验的准确度,同时应提取周围正常组织,作理化检验的空白对照,提取后,留做病理组织学检验的检材应放入固定液固定; 留做理化检验及其空白对照的检材应按相关要求包装送检。
4.1.3 其他体表损伤和病变的提取方法和要求:提取病变或损伤处检材均应带有部分正常组织,应尽量提取完整的损伤或病变区,并对提取检材的部位进行标注、定位。
4.2 解剖检验器官的提取方法和要求
4.2.1 颈部、胸腔器官
颈部、胸腔器官有联合提取和分别提取两种方法,可根据不同情况采取适当方法,大体标本的提取和取材:
--颈部及肺脏器官:大体标本提取喉部(含会厌软骨、声带皱劈)1块、气管横切取1段、甲状腺(全部)及完整的双肺固定;固定后,左、右肺五叶常规各取1块,如有病变,在病变与邻肺组织处按需取材:纵向取喉头组织1块,气管横切取1块,甲状腺左右叶各取1块;
--心脏:详见9.4:疑有心血管畸形,应将肺和心脏一并取出检验,必要时在不破坏病变的基础上切开肺和心脏固定;
--胸腺:提取完整胸腺固定;固定后取1~ 2块组织块。
4.2.2 腹腔器官
腹腔器官的大体标本提取和取材:
--脾脏:提取完整脾脏或部分脾脏组织固定:固定后,取1~ 2块组织块(含包膜、白髓及红髓);
--胃和十二指肠:提取胃、十二指肠各1块,有病变时加取病变及周边组织,伸展肠壁将浆膜面粘附在纸上后固定,固定后,沿管腔长轴各取1 ~
2块组织块(含全层);
--小肠、结肠:提取空肠(接近十二指肠悬韧带的远端横切取1块)、回肠(距盲肠约20cm处切1块)、结肠各1小段、阑尾(全部)等,伸展肠壁将浆膜面粘附在纸上后周定:固定后,各取1 ~ 2块组织块(含全层)。
--胰腺:提取完整的胰腺或部分胰腺组织固定;固定后,头、尾各取1~ 2块;
--肝脏利胆囊:提取肝左右叶最厚处肝组织各1块固定,有病变或损伤时应提取完整的肝脏,提取完整的胆囊固定:固定后,肝左右叶各取1 ~
2块组织块(含被膜),胆囊壁取1 ~2块组织块;
--肾脏和肾上腺:提取完整的双侧肾脏或部分肾脏组织(含被膜、皮质、髓质、乳头和肾盂),提取完整的双侧肾上腺,肾上腺可单独包装后放入固定液固定:固定后,双侧肾各取1 ~ 2块组织块(含被膜、皮质、髓质),双侧肾上腺各取1~2块组织块(含被膜的皮质与髓质);
--其他脏器组织:必要时,提取腹主动脉、下腔静脉、肠系膜淋巴结等检材。
4.2.3 盆腔器官
盆腔器官的大体标木提取和取材:
--睾丸和附睾;提取完整的双侧睾丸及附睾或其部分组织固定;固定后,各取1~ 2块组织块;
--子宫及附件:提取完整的子宫,卵巢,输卵管或其部分组织固定;固定后,各取1~ 2块组织;
--膀胱和前列腺:提取完整的膀胱,前列腺或其部分膀胱组织固定;固定后,各取1~ 2块组织块。
4.2.4 骨骼检材提取
对疑有造血系统疾病者,可提取3处以上的骨髓做组织细胞学检验,常取的部位有骼前上嵴、胸骨、肋骨、股骨等,或取3cm厚的骨放入周定液内固定。
对骨骼组织病理学检验的,用细齿骨锯或硬骨刀切取骨片,固定充分后脱钙处理,然后再适量或全部取材。
4.2.5 颅脑器官
颅腔器官的大体标本提取和取材:
--脑:脑的提取和取材见8.2;
--脑垂体:用剪刀、镊子分离蝶鞍内脑垂体周围软组织,将垂体取出,作一横切面,单独包装放入固定液固定;固定后,取1~ 2块组织块;
--脊髓:解剖取出后将将脊髓放入固定液固定;固定后,常规取1~ 2块组织块,如在脊髓颈、胸、腰段疑有损伤或病变,对相应部位提取组织块。
5法医病理学检材的固定液选择及配制方法
5.1 固定液的选择
除特殊病变或由于检验鉴定需要使用酒精及其他固定液外,应选择使用10%福尔马林固定液。
5.2 常用固定液的配制方法
5.2.1 10%福尔马林固定液(1+9):福尔马林和蒸馏水(或自来水)按(1+9)的体积比混匀, 应现用现配,并注明固定液名称、配制浓度、日期及配制人。也可直接购买。
注:福尔马林即甲醛的水溶液,一般含有37%~40%甲醛,是一种普遍应用的常规固定剂。
5.2.2 10%中性福尔马林固定液(1000mL):福尔马林100mL,无水磷酸二氢钠6.5g,磷酸氢二钠4.0g,蒸馏水900mL,混匀,应定期测量pH值。
注:福尔马林经日光或久放与空气接触后,被氧化自行分解产生甲酸而呈酸性,用酸性福尔马林固定含血液较多的组织或损伤出血灶,易使出血灶呈黑色或在组织内形成棕黑色的福尔马林色素沉淀,为了避免福尔马林色素沉淀,可用 pH7.0 ~ 7.4的磷酸盐缓冲液配制10%中性福尔马林固定液。
5.3 其他固定剂
有冰醋酸、升汞、重铬酸钾、苦味酸等固定剂,一般很少单独使用。
6法医病理检材的固定方法和要求
6.1 检材的固定要求
6.1.1 固定时机
尸体检验结束后,提取的检材应立刻放入固定液内固定。
6.1.2 固定容器
每起案件一般应准备好两件专用固定容器(两个玻璃缸或塑料桶),大小要求直径不小于30cm,高不低于32cm,并带有严密的封盖。心脏及脑放一个容器,其他器官组织块放一个容器,防止器官挤压、变形,有利于器官的固定,固定检材的容器上应编号,并注明死者姓名、性别、年龄、尸体检验日期、固定日期等信息,以免与其他案件检材混淆,一个容器不应同时固定多起案件的检材。
6.1.3 容器放置
按检材是否取材完毕、检验报告是否完成把检材容器放置在已检区、在检区和待检区,
三个区域的检材容器均应按案件标号顺序依次摆放,对传染性尸体检材,应用红笔标注检材容器,检材单独固定专人保管,放置在实验室特定区间内保存。
6.1.4 固定液用量
固定液的用量要充足,一般用量应为所固定器官的总体积的2倍以上,最少应将标本全部浸没。检材固定数天后,视情况更换固定液。
6.1.5 固定时间
固定时间应根据检材的大小、种类及检验目的而定。依照本标准取材的组织块一般应固定24h~48h,大体标本一般应周定3~5天。
6.2 检材的国定方法
6.2.1 大脑
大脑取出后,自两大脑半球中间用力切断胼胝体,使固定液进入脑室,可用粗线穿过基底动脉,将大脑悬吊在国定液中,用容器盖压住线的两端,可防止大脑变形,大脑检材固定 24h后,可更换一次固定液,固定一周左右再行切脑检验,应立即检验的除外。
6.2.2 心脏
沿血流方向剪开心脏后固定;如有损伤或病变,为不破坏损伤或病变,可将完整的心脏先固定,后剪开,两种情况均可用针穿破房间隔,做一结扎线,使心脏悬吊在固定液内,可同大脑标本悬吊一起固定。
6.2.3 其他器官
除心脏、大脑完整提取外,其他器官有严重病变或损伤时,在不破坏损伤和病变的基础上切开后全部提取固定,为了防止器官损伤和病变的变形而影响观察,可单独固定保存,也可采用悬吊或在检材缸或桶底放一定数量的脱脂棉等办法。 应以能防止检材变形又能充分固定为原则决定固定方式。其余器官的组织块可放在一起固定,固定后及时翻动检材一次,以使检材充分固定。对于肾上腺、胸腺、甲状腺、垂体等体积较小的器官固定时,可用医用纱布等单独包装,标注、固定。
7法医病理检材的包装,送检方法及要求
7.1 检材的包装和送检方法
送检距离较近或条件许可时,可以原固定容器密封后直接送检,当需要长途运输,需要取出检材包装送检的,宜在固定 7天后为佳,检验记录所提取器官,分别用浸过福尔马林的妙布包3 ~ 4层,器官的组织块可用纱布包在一起,包3 ~4层,分别装入塑料袋内密封,装入较硬壳的纸箱、木箱或塑料桶内,严防检材挤压,密封后加封送检单位封条,用胶布标明死者姓名、性别、年龄及送检单位、固定时间、送检日期等信息,粘贴在送检纸箱等送检包装物上。
7.2 检材送检报告单
送检时需要填写送检报告单,一般应包括如下信息:
--死者姓名、性别、年龄、身份证号及职业等个人信息;
--简要案情、死亡过程及医院诊断治疗病历等案件信息;
--死亡时间、检材提取时间、尸检阳性所见及详细的尸体检验记录等尸体检验信息;
--检材的名称、数量、提取部位标注或示意图及固定液名称、固定时间等检村信息;
--送检人姓名、委托单位、委托要求及其他有关约定等委托信息。
8法医病理实验室检验及主要器官的切取方法
8.1 心脏的检验及切取方法
8.1.1 心脏的解剖
常按下述方法沿血流方向剖开心脏:
--右心的剖开:用刀或剪刀由下腔静脉口通过右心房至上腔静脉作直线剖开,观察房空口和三尖瓣的情况,用手指探查三尖瓣的宽度,沿右心室右缘剖至心尖部,从心尖部沿着距离室中隔右侧约 1cm的平行线,剖开右心室前壁和肺动脉;
--左心的剖开:用刀或剪刀从左右肺静脉口间剖开左心房,观察房室口和二尖瓣情况,检验有无赘生物或瓣膜狭窄,沿左心室左缘剖开至心尖部,从心尖部沿着距离室中隔左侧约 lcm的平行线剖开左心室前壁,至左心耳右缘后再剪开主动脉。
8.1.2 心脏的检验
按照 GA/T 147执行。
8.1.3 心脏的取材
取左室前、后壁全层,左心室侧壁,左室心尖部,右室壁、左房壁、右房壁、室中隔 (左室前)、左室乳头肌各1 ~ 2块组织块(包含全层);疑有瓣膜病时,取相应瓣膜检验。冠状动脉可在左前降支和右冠状动脉处横切,常规各取1 ~2块,涉及病变,病变处按需取材。
心脏传导系统的取材:
--窦房结:位于上腔静脉与右心房之交界,在界嵴上下。取组织块时,可在上述部位纵切含上腔静脉及右房各半,宽约 3cm ~ 4cm组织,并分切成5 ~ 6个组织块;
--房室结、房室束及浦肯野氏纤维:房室结位于冠状静脉窦开口和室中隔膜部后缘之间,在三尖瓣附着处上缘的右心房心内膜下,呈椭圆形态。取材时,先在冠状静脉窦左侧作一垂直切面,然后包括房中隔及室中隔在内取一较大的组织块,包括房室结、房室束及其左右支在内的传导组织,循心脏前后方向垂直地切成大小相近的组织 5 ~ 6块,按位置编号,制成蜡块,连续切片镜检。
8.2 脑的检验及切取方法
8.2.1 大脑
大脑的切开检验多在甲醛溶液固定后进行,有冠状、矢状和水平三种切法,应根据案情及颅脑外部检验的结果决定用何种方式,以充分暴露病变又有利于标本的保存,一般多采用冠状切法。 大脑的冠状切法及取材按如下步骤进行:
--脑底向上,从乳头后缘以水平方向切断脑干,从脑干两侧将小脑脚切断,取下小脑,检验中脑导水管及第四脑室有无病变;
--摆正脑的位置,脑顶朝下平置台上,左手扶脑,右手持脑刀,用刀刃的后部对准下述规定的标志,用力均匀由前向后一次切下,不应反复前后拖拉;
--固定好的大脑常采用十二刀十三块的切法,方法如下:
l 第一至三刀自额极至颞极前均等切,检验额叶面的灰质与白质,在第二刀之切面上切取块; l 在颞极至漏斗中点切第四刀,在额中回、扣带回取材各一块; l 在漏斗基底部切第五刀,检验尾状核头部、豆状核及第三脑室,在下丘脑处取材一块; l 在乳头后缘切第六刀,检验尾状核体部、豆状核、内囊、外囊、丘脑前部、杏仁核等,在杏仁核处取材一块; l 经中脑横向中央线处切第七刀,检验乳头体、视丘、尾状核、屏状核、杏仁核等,在乳头体处取材一块; l 经中脑后缘处切第八刀,检验视丘后部、红核、黑质、海马、侧脑室等,在海马、丘脑处各取材一块; l 经胼胝体后缘切第九刀,检验视丘、海马、尾状核等,在顶叶处取材一块; l 第十、十一、十二刀自胼胝体后缘至枕极均等切,检验顶枕叶的灰质与白质,在枕叶放射区取材一块; l 将取下的脑组织块按顺序平置于方盘内,按顺序将所取检材编号,并绘制简图、制片,靠近脑膜处之检村均应附有脑膜; l 经肉眼观察有或疑有病变的部位,在相应病变部位取材并编号、绘图、制片,取材时应带有正常组织。
8.2.2 小脑
小脑的检验及取材
--先于小脑蚓部作一矢状切面,将小脑两半球分开,检验第四脑室后将小脑与脑干分离;
--由小脑后外斜向小脑底作多个矢状切面,检验齿状核等有无病变;
--小脑常规取材应为 1 ~ 2块,应包括脑膜、小脑皮质、齿状核等。
8.2.3 脑干
脑干的检验及取材:
--沿脑干作多个相隔 05cm的横切面,检验中脑、桥脑、延脑各切面有无出血等病变。对疑原发性脑干损伤的检材,需注意在相应神经根切面检材;
--常规取中脑、桥脑、延脑、桥延沟各 1 ~ 2块,也可根据情况适当多取,疑有病变时,在相应部位取检材。
9法医病理检材的保存与处理
9.1 提取的病理检材,除一部分制片外,其余的应放入标本缸内加入固定液保存,保存期限原则上为鉴定文书发出后12个月, 双方另有明确约定的,按约定处理。保存时应用碳素墨水书写至标签上,标注死者姓名、年龄、性别及检验鉴定编号等信息。
9.2 接收送检的病理鉴定机构,在检验完成后,应告知送检单位及时领取剩余的检材。送检单位应按照有关法律法规规范保存。
9.3 蜡块及切片放入蜡块柜和切片柜,由检验鉴定单位长期保存。